Biotin-Dadps-azide（DADPS疊氮生物素）是一種結(jié)合了生物素、DADPS（二氨基二苯砜）和疊氮基團(tuán)的多功能生物化學(xué)試劑，在生物化學(xué)和分子生物學(xué)領(lǐng)域具有廣泛應(yīng)用。

一、化學(xué)結(jié)構(gòu)與組成

• 生物素（Biotin）：一種水溶性維生素（維生素B7），具有與親和素（如Avidin或Streptavidin）形成強(qiáng)有力結(jié)合的能力（結(jié)合常數(shù)Kd≈10?1? M）。這種高親和力使得生物素常被用于生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中的標(biāo)記和分析。

• DADPS（二氨基二苯砜）：一種穩(wěn)定的砜類(lèi)化合物，具有良好的反應(yīng)活性和穩(wěn)定性。它作為連接生物素和目標(biāo)分子之間的橋梁，提供了一種穩(wěn)定的化學(xué)鍵，同時(shí)保持生物素的反應(yīng)活性。DADPS鍵是一種酸敏感或還原敏感的可斷裂硅氧鍵，能夠在溫和條件下選擇性裂解，從而釋放下游連接分子。

• 疊氮基（Azide）：一種能與炔烴或丙炔酸酯發(fā)生反應(yīng)的基團(tuán)。在銅離子催化下，疊氮基與炔烴的反應(yīng)可以實(shí)現(xiàn)生物素與目標(biāo)分子之間的共價(jià)偶聯(lián)，形成穩(wěn)定的三唑鍵。

結(jié)構(gòu)式：

二、物理化學(xué)性質(zhì)

• 外觀：淡黃色或白色固體。

• 分子式：C??H??N?O?SSi。

• 分子量：886.19。

• 溶解性：溶于大部分有機(jī)溶劑，也溶于水。

• 儲(chǔ)存條件：建議儲(chǔ)存在-20℃的干燥、通風(fēng)良好的庫(kù)房中，避免頻繁解凍和冷凍。取用時(shí)需保持干燥。

三、功能與應(yīng)用

1. 生物分子標(biāo)記：

• 通過(guò)其疊氮基團(tuán)與炔烴的反應(yīng)，Biotin-Dadps-azide可以實(shí)現(xiàn)生物素與目標(biāo)分子（如蛋白質(zhì)、核酸）之間的共價(jià)偶聯(lián)，從而進(jìn)行生物分子的標(biāo)記。

• 標(biāo)記后的生物分子可以通過(guò)生物素-親和素系統(tǒng)進(jìn)行高靈敏度的捕獲和檢測(cè)。

2. 蛋白質(zhì)組學(xué)研究：

• 在蛋白質(zhì)組學(xué)中，Biotin-Dadps-azide可用于蛋白質(zhì)的標(biāo)記和純化。通過(guò)疊氮基與炔基修飾的蛋白質(zhì)發(fā)生點(diǎn)擊反應(yīng)，再利用生物素-親和素系統(tǒng)富集標(biāo)記蛋白，實(shí)現(xiàn)下游質(zhì)譜分析。

• DADPS鍵的可裂解性使得在溫和條件下可以釋放純化蛋白，避免強(qiáng)變性條件對(duì)蛋白活性的影響。

3. 化學(xué)生物學(xué)研究：

• Biotin-Dadps-azide可用于研究細(xì)胞內(nèi)外生物分子的功能和機(jī)制，探索生物系統(tǒng)的復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)。

• 通過(guò)結(jié)合代謝標(biāo)記或化學(xué)探針技術(shù)，將生物素引入特定蛋白質(zhì)，實(shí)現(xiàn)細(xì)胞表面或細(xì)胞內(nèi)的標(biāo)記和追蹤。

4. 可控釋放體系：

• DADPS鍵作為一種“化學(xué)開(kāi)關(guān)"，在選擇性條件下可斷裂，實(shí)現(xiàn)對(duì)偶聯(lián)分子的可控釋放。

• 這種設(shè)計(jì)特別適合需要“捕獲-檢測(cè)-釋放"的實(shí)驗(yàn)流程，如藥物遞送系統(tǒng)中的精準(zhǔn)釋放。

5. 生物探針構(gòu)建：

• Biotin-Dadps-azide的疊氮基使其成為構(gòu)建功能探針的重要工具?？膳c炔基染料、藥物或納米材料結(jié)合，開(kāi)發(fā)熒光探針、藥物偶聯(lián)物或功能材料。

• 拓展在成像、診斷及治療中的應(yīng)用，如生物芯片和傳感平臺(tái)的快速固定與檢測(cè)。

四、制備與純化

• 制備：通常涉及將生物素、DADPS和疊氮基團(tuán)通過(guò)化學(xué)方法連接在一起，形成三功能化合物。具體步驟可能包括生物素的活化、DADPS的引入以及疊氮基的修飾。

• 純化：通過(guò)透析、超濾或柱層析等方法去除未反應(yīng)的原料和副產(chǎn)物，得到高純度的Biotin-Dadps-azide。

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