基本信息

中文名稱: 脫硫生物素-三聚乙二醇-炔基

英文名稱: Desthiobiotin-PEG3-Alkyne

英文同義詞: Desthiobiotin-PEG3-Alk

分子式：C19H33N3O5

分子量：383.49

存儲(chǔ)溫度：-20℃

純度：95%

結(jié)構(gòu)式：

核心功能與應(yīng)用

1. 生物分子標(biāo)記與檢測(cè)

• 通過炔基與疊氮修飾的蛋白、核酸或抗體反應(yīng)，實(shí)現(xiàn)目標(biāo)分子的特異性標(biāo)記。

• 脫硫生物素部分可進(jìn)一步與鏈霉親和素結(jié)合，用于親和純化或熒光檢測(cè)（如結(jié)合熒光染料標(biāo)記的鏈霉親和素）。

2. 可逆親和純化

• 標(biāo)記后的復(fù)合物可通過游離生物素競(jìng)爭(zhēng)洗脫，避免傳統(tǒng)生物素-鏈霉親和素系統(tǒng)所需的強(qiáng)變性條件（如高溫或高鹽），從而保護(hù)樣品活性。

• 適用于動(dòng)態(tài)研究（如細(xì)胞表面受體內(nèi)吞）或脆弱蛋白的分離。

3. 活細(xì)胞成像與動(dòng)態(tài)追蹤

• SPAAC反應(yīng)無需金屬催化劑，毒性低，適合活細(xì)胞內(nèi)代謝標(biāo)記或?qū)崟r(shí)追蹤分子動(dòng)態(tài)。

• 例如，標(biāo)記細(xì)胞表面糖蛋白以研究其內(nèi)吞途徑。

4. 蛋白質(zhì)組學(xué)與藥物開發(fā)

• 在蛋白質(zhì)相互作用分析中，通過可逆標(biāo)記減少非特異性結(jié)合，提高數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性。

• 用于靶向藥物遞送系統(tǒng)的開發(fā)，如生物素化納米顆粒的定向修飾。

實(shí)驗(yàn)操作要點(diǎn)

1. 溶解與儲(chǔ)存

• 通常溶于DMSO或水（需超聲助溶），建議分裝后于-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融導(dǎo)致降解。

• 工作濃度一般為1–10 mM（DMSO儲(chǔ)備液），需根據(jù)實(shí)驗(yàn)體系優(yōu)化。

2. 點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)條件

• CuAAC反應(yīng)：需添加銅催化劑（如CuSO?）、還原劑（如抗壞血酸鈉）及配體（如TBTA）以提高效率，但可能對(duì)細(xì)胞有毒。

• SPAAC反應(yīng)：無需金屬催化劑，使用DBCO-疊氮化物更溫和，適合活細(xì)胞標(biāo)記。

3. 洗脫與檢測(cè)

• 親和純化時(shí)，用含游離生物素（如1–5 mM）的緩沖液競(jìng)爭(zhēng)洗脫，避免使用SDS或高溫。

• 檢測(cè)可通過熒光、質(zhì)譜或Western blot實(shí)現(xiàn)，需根據(jù)標(biāo)記物類型選擇合適方法。

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