生物素-酪氨（Biotinyl Tyramide）是一種結(jié)合了生物素（Biotin）與酪氨（Tyramide）的生物標(biāo)記試劑，在生物化學(xué)和生物醫(yī)學(xué)研究中具有廣泛應(yīng)用，尤其在信號放大技術(shù)中表現(xiàn)突出。

一、結(jié)構(gòu)特性

生物素-酪氨由生物素與酪氨通過共價鍵連接而成，分子式為C??H??N?O?S，分子量為363.48。其結(jié)構(gòu)包含兩部分：

• 生物素部分：具有特殊的五元環(huán)與六元環(huán)相連結(jié)構(gòu)，賦予其與鏈霉親和素（Streptavidin）或親和素（Avidin）較高的親和力（結(jié)合常數(shù)Kd≈10?1? M），形成穩(wěn)定復(fù)合物。

• 酪氨部分：作為過氧化物酶（如辣根過氧化物酶，HRP）的底物，含有活性酚羥基，可在HRP催化下生成高活性自由基，與周圍生物分子共價結(jié)合。

結(jié)構(gòu)式：

二、作用機制

生物素-酪氨的核心功能是通過酪胺信號放大（Tyramide Signal Amplification, TSA）技術(shù)實現(xiàn)信號增強，其過程如下：

1. HRP催化反應(yīng)：HRP標(biāo)記的抗體或探針識別靶點后，在過氧化氫（H?O?）存在下，催化生物素-酪氨的酪氨部分生成高活性自由基。

2. 共價沉積：自由基與靶點附近的蛋白質(zhì)或核酸中的酪氨酸殘基共價結(jié)合，將生物素標(biāo)記固定于靶區(qū)域。

3. 二級信號放大：通過鏈霉親和素偶聯(lián)物（如熒光染料、酶或金屬粒子）結(jié)合生物素，進一步放大信號，提高檢測靈敏度。

三、應(yīng)用領(lǐng)域

生物素-酪氨因其高靈敏度和特異性，廣泛應(yīng)用于以下領(lǐng)域：

1. 免疫組織化學(xué)（IHC）：

• 檢測低表達抗原，減少非特異性背景信號。

• 克服固定程序不理想或靶蛋白表達水平低導(dǎo)致的弱免疫標(biāo)記問題。

2. 熒光原位雜交（FISH）與原位PCR：

• 增強核酸探針的信號，便于觀察核酸分布和表達情況。

3. 蛋白質(zhì)組學(xué)研究：

• 標(biāo)記特定蛋白質(zhì)或肽段，研究蛋白質(zhì)相互作用、定位及翻譯后修飾。

4. 細胞生物學(xué)研究：

• 標(biāo)記細胞表面分子，追蹤其動態(tài)變化及與其他分子的相互作用。

5. 藥物研發(fā)：

• 作為藥物載體，通過靶向識別腫瘤細胞表面受體，實現(xiàn)精準(zhǔn)藥物遞送。

6. 多重染色與電鏡免疫標(biāo)記：

• 在多輪免疫染色中作為穩(wěn)定標(biāo)記形式，或配合金標(biāo)鏈霉親和素用于高分辨率定位。

四、儲存條件

為保持生物素-酪氨的穩(wěn)定性，需遵循以下儲存條件：

• 溫度：建議避光保存于-20℃以下，部分產(chǎn)品可短期儲存于-15℃。

• 避光防潮：防止光照和潮濕環(huán)境導(dǎo)致分解。

• 溶劑：通常以二甲基亞砜（DMSO）為溶劑，需密封保存以避免揮發(fā)。

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