如何確定熒光染料的激發(fā)波長/發(fā)射波長？

熒光光譜分為：激發(fā)光譜（PLE）和發(fā)射光譜（PL）。

激發(fā)光譜：固定發(fā)射光的波長，改變激發(fā)光的波長，記錄熒光強度隨激發(fā)波長的變化。發(fā)射光譜：固定激發(fā)光的波長，記錄不同發(fā)射波長處熒光強度隨發(fā)射波長的變化。

無論是激發(fā)還是發(fā)射熒光光譜圖，其都是記錄發(fā)射熒光強度隨波長的變化。所以熒光光譜中縱坐標為強度，橫坐標為波長。首先從圖中能獲取峰位和半峰寬。峰位的直觀體現(xiàn)是熒光的顏色；半峰寬則表示熒光的純度。

因此可以根據(jù)這種熒光素的激發(fā)譜線來確定其激發(fā)波長，根據(jù)其發(fā)射譜來確定其發(fā)射波長。

激發(fā)譜：不同波長的光激發(fā)熒光素后，熒光強度的變化。

發(fā)射譜：同一波長的光激發(fā)熒光素后，各波長下的熒光強度的變化。

一般都取峰值。

其發(fā)射波長會隨激發(fā)波長變嗎？

對不同材料來說不同，絕大多數(shù)情況下，發(fā)射波長會隨著激發(fā)波長的偏移而有所偏移。 對于固態(tài)物質(zhì)，主要是因為分子與其它材料形成了π建，對于量子點溶液，激發(fā)波長也會顯著導致發(fā)射光譜的不同。 但是不是絕對的，比如對于Alex555分子，發(fā)射波長的偏移往往就相對較小，這是由于分子內(nèi)部的能帶結(jié)構(gòu)所決定的。

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Cy3-NHS; Cy3 NHS Ester  146368-16-3

Cy3-alkyne 1010386-62-5

Cy5   146368-11-8

Cy5-NHS;Cy5 NHS Ester  146368-14-1

Cy5-alkyne 1345823-20-2

Cy7   943298-08-6

Cy7-NHS; Cy7 NHS Ester  477908-53-5

Cy7-alkyne

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