Globo-H的制備方法有哪些
2025-09-03
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Globo-H 的制備方法主要包括化學(xué)合成法和化學(xué)酶法,以下是對這兩種方法的詳細介紹:
化學(xué)合成法
Schmidt 的三氯乙酰亞胺酯法:
該方法利用三氯乙酰亞胺酯作為糖基給體,通過糖苷化反應(yīng)將各個糖單元連接起來,形成 Globo-H 的六糖結(jié)構(gòu)。
Boons 的雙向糖苷化法:
該方法通過雙向糖苷化反應(yīng),即同時從兩個方向進行糖苷化,來構(gòu)建 Globo-H 的六糖結(jié)構(gòu)。
Wong 的基于糖基給體活性差異的一鍋煮策略:
該方法利用不同糖基給體的活性差異,通過一鍋煮的方式將各個糖單元連接起來。
Seeberger 的液相線性合成和固相自動組裝法:
液相線性合成法通過逐步添加糖單元來構(gòu)建 Globo-H 的六糖結(jié)構(gòu)。
固相自動組裝法則利用固相載體來固定糖單元,通過自動化的合成設(shè)備來構(gòu)建六糖結(jié)構(gòu)。
Huang 的多組份反復(fù)預(yù)活化一鍋煮法:
該方法通過多組份反復(fù)預(yù)活化的方式,提高糖苷化反應(yīng)的效率,從而在一鍋煮的條件下完成 Globo-H 的六糖結(jié)構(gòu)的構(gòu)建。
化學(xué)酶法
酶促糖苷化法:
該方法利用糖基轉(zhuǎn)移酶等酶類來催化糖苷化反應(yīng),將各個糖單元連接起來形成 Globo-H 的六糖結(jié)構(gòu)。
酶促糖苷化法具有立體選擇性和區(qū)域選擇性高的優(yōu)點,且反應(yīng)條件溫和,對環(huán)境友好。
利用糖基轉(zhuǎn)移酶大量制備 Globo-H 的方法:
該方法利用分子生物學(xué)技術(shù)構(gòu)建糖基轉(zhuǎn)移酶和糖核苷酸差向異構(gòu)酶表達載體,轉(zhuǎn)化入大腸桿菌進行過量表達,目的蛋白進行粗略純化后在體外催化寡糖的合成。
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