NHS-5(6)Carboxyrhodamine（5(6)-羧基四甲基羅丹明琥珀酰亞胺酯，TAMRA-SE）是一種重要的熒光標(biāo)記試劑，在生物化學(xué)和分子生物學(xué)領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用，具體用途如下：

1. 蛋白質(zhì)標(biāo)記與免疫檢測(cè)

• 蛋白質(zhì)標(biāo)記：NHS-5(6)Carboxyrhodamine可通過(guò)其NHS酯基團(tuán)與蛋白質(zhì)、抗體、肽等生物分子中的氨基（-NH?）發(fā)生共價(jià)偶聯(lián)反應(yīng)，形成穩(wěn)定的酰胺鍵。這種標(biāo)記方式適用于多種蛋白質(zhì)，如酶、抗體等，便于后續(xù)的熒光檢測(cè)和分析。

• 免疫分析：在免疫分析中，NHS-5(6)Carboxyrhodamine標(biāo)記的抗體可用于Western Blot、免疫熒光染色等技術(shù)，用于分析和定量目標(biāo)蛋白。其強(qiáng)熒光信號(hào)和良好的光穩(wěn)定性使得檢測(cè)結(jié)果更加準(zhǔn)確可靠。

• 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）：NHS-5(6)Carboxyrhodamine可偶聯(lián)到抗體上，通過(guò)熒光信號(hào)進(jìn)行定量分析，提供比傳統(tǒng)顏色基質(zhì)更高的靈敏度。

2. 核酸標(biāo)記與檢測(cè)

• 寡核苷酸標(biāo)記：NHS-5(6)Carboxyrhodamine可用于標(biāo)記寡核苷酸、DNA/RNA探針，適用于熒光原位雜交（FISH）、自動(dòng)DNA測(cè)序等實(shí)驗(yàn)。其熒光特性使得核酸分子在檢測(cè)中更加容易被追蹤和定位。

• DNA/蛋白質(zhì)標(biāo)記與細(xì)胞染色：由于NHS-5(6)Carboxyrhodamine穩(wěn)定的熒光特性和對(duì)pH的不敏感性，它也適用于DNA/蛋白質(zhì)的標(biāo)記和細(xì)胞染色，有助于研究核酸與蛋白質(zhì)的相互作用。

3. 細(xì)胞成像與追蹤

• 細(xì)胞內(nèi)靶蛋白標(biāo)記：NHS-5(6)Carboxyrhodamine可標(biāo)記細(xì)胞內(nèi)靶蛋白，實(shí)現(xiàn)高對(duì)比度熒光成像。其橙紅色熒光可避開(kāi)生物組織自發(fā)熒光干擾，提高成像的清晰度。

• 細(xì)胞追蹤與定位：通過(guò)將NHS-5(6)Carboxyrhodamine偶聯(lián)到細(xì)胞表面分子或抗體上，研究人員可以定量分析細(xì)胞群體的免疫表型和分子表達(dá)，追蹤細(xì)胞在體內(nèi)的分布、遷移和相互作用。

• 活體成像：結(jié)合近紅外染料，NHS-5(6)Carboxyrhodamine還可用于動(dòng)物活體深層組織成像，為生物醫(yī)學(xué)研究提供有力工具。

4. 分子相互作用研究

• 熒光共振能量轉(zhuǎn)移（FRET）：NHS-5(6)Carboxyrhodamine可作為FRET技術(shù)中的受體染料，與FAM等供體染料配對(duì)，研究分子間相互作用。這種技術(shù)在蛋白質(zhì)構(gòu)象變化、DNA雜交等領(lǐng)域具有廣泛應(yīng)用。

• 金屬離子與酶活性檢測(cè)：通過(guò)連接酶底物或離子螯合劑（如BAPTA），NHS-5(6)Carboxyrhodamine可構(gòu)建熒光探針，檢測(cè)金屬離子（Ca2?、Mg2?）或酶活性變化。

5. 多肽標(biāo)記與功能研究

• 多肽標(biāo)記：NHS-5(6)Carboxyrhodamine可用于標(biāo)記合成多肽，研究其結(jié)構(gòu)與功能。這種標(biāo)記方式有助于揭示多肽在生物體內(nèi)的作用機(jī)制和信號(hào)傳導(dǎo)途徑。

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