CY5標(biāo)記單層Ti?C?T?的制備方法主要分為共價(jià)偶聯(lián)法和非共價(jià)作用法兩大類，具體如下：

一、共價(jià)偶聯(lián)法

共價(jià)偶聯(lián)法通過化學(xué)鍵將CY5與單層Ti?C?T?結(jié)合，形成穩(wěn)定的標(biāo)記結(jié)構(gòu)。具體步驟如下：

1. 表面氨基化修飾：
   使用硅烷化試劑（如APTES）對(duì)單層Ti?C?T?進(jìn)行表面修飾，引入氨基（-NH?）基團(tuán)。這一步驟為后續(xù)與CY5的異硫氰酸酯基團(tuán)（-NCS）反應(yīng)提供活性位點(diǎn)。

2. CY5異硫氰酸酯反應(yīng)：
   將修飾后的Ti?C?T?與CY5異硫氰酸酯（RITC）反應(yīng)，氨基與異硫氰酸酯基團(tuán)形成共價(jià)鍵，實(shí)現(xiàn)CY5的標(biāo)記。

3. EDC/NHS介導(dǎo)的偶聯(lián)反應(yīng)：
   另一種方法是利用EDC（1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺）和NHS（N-羥基琥珀酰亞胺）活化Ti?C?T?表面的羥基（-OH），使其與CY5的羧基（-COOH）直接偶聯(lián)，形成穩(wěn)定的酰胺鍵。

二、非共價(jià)作用法

非共價(jià)作用法利用物理相互作用（如靜電吸附、π-π堆積、氫鍵等）實(shí)現(xiàn)CY5與單層Ti?C?T?的結(jié)合。具體方法包括：

1. 靜電吸附：
   單層Ti?C?T?表面因終止基團(tuán)（-F、-OH等）帶負(fù)電，可通過靜電作用吸附帶正電的CY5衍生物（如CY5-NH?）。

2. 層間插入：
   利用Ti?C?T?的層狀結(jié)構(gòu)，通過超聲或攪拌使CY5分子插入層間，形成穩(wěn)定的復(fù)合物。

3. π-π堆積與氫鍵作用：
   CY5分子中的芳香環(huán)與Ti?C?T?表面的共軛結(jié)構(gòu)通過π-π堆積作用結(jié)合，同時(shí)羥基等官能團(tuán)可形成氫鍵，增強(qiáng)標(biāo)記穩(wěn)定性。

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